Análise de PCR: o que é? Como tomar a análise PCR

Non hai moito tempo desenvolveu un método fiable, altamente sensible e rápida para o diagnóstico de diversas enfermidades infecciosas en humanos. Un tal método é chamado de "análise de PCR". Que é, o que é a súa esencia, o que pode identificar microorganismos e como tomalo, iremos describir neste artigo.

Historia do descubrimento

Inventou a reacción en cadea da polimerase (PCR) é un científico estadounidense Keri Myullis en 1983. Inicialmente, o patentes método de diagnóstico por "Cetus Corporation," en que traballou eo seu creador. Pero, en 1992, todos os dereitos e patentes foron vendidas para a empresa "Hoffman-La Roche." Despois diso, descubriuse que estudos similares foron realizadas en paralelo e foron relatadas por outros biólogos estadounidenses, como Elis Chen, David Edgar, John rre. En 1980 el participou nesta cuestión e os científicos soviéticos A. Slyusarenko A. Kaledine e S. Gorodetsky. Polo tanto, para determinar o propietario dos dereitos de autor único non se pode. Moitos bioquímicos pendentes teñen contribuído ao desenvolvemento de métodos de reacción de polimerase e CERN patentes as súas innovacións. Neste punto a análise de PCR realizouse nos laboratorios especialmente equipados.

Resumo PCR de diagnóstico

análise de PCR: que é e como funciona? A esencia do método reside no feito de que, mediante unha polimerase de ADN particular encima in vitro para aumentar en ambiente microbiana volume específico. Para este material ADN repetido multiplican dispoñible. Así, a presenza dun axente patóxeno, nunha mostra a cantidade será aumentada a costa de manipulación de laboratorio bioquímico, e bacterias non será difícil de detectar no microscopio.

Como é o estudo do material?

Para realizar a análise necesaria:

• O molde de ADN;
• material de iniciadores que une os extremos do fragmento;
• encima ADN polimerase termoestable;
• produtos químicos, asegurar unha operación adecuada de encimas;
• solución tampón é necesario para crear as condicións adecuadas para o crecemento e desenvolvemento do material de ADN.

Para realizar PCR operar 25-30 repeticións que consisten en tres etapas: desnaturao, vinculación e along.

Para analizar reacción en cadea polimezarnoy usando un dispositivo especial - cycler. equipamento moderno permite que instala o necesario programa de tubos de calefacción e refrixeración para eliminar erros durante o diagnóstico.

Onde aplicar o diagnóstico?

Polimezarnoy método de reacción en cadea son usados en varios campos da medicina:

• uso forense para identificar o material xenético, como o pelo, saliva ou sangue;
• A análise de PCR de sangue contribúe genotipagem, por exemplo, para a detección de resposta plantas xenética individual a unha droga específica;
• Por un método definir os lazos familiares entre as persoas;
• método de PCR-demandado máis tornouse no diagnóstico médico para a determinación de varias enfermidades infecciosas.

Que infeccións revela PCR?

Así, a medicina foi utilizado con éxito análise de PCR. Que é, xa aprendemos. E algúns patógenos poden ser detectados con el? PCR diagnosticado seguintes infeccións :

• hepatite A, B, C,
• ureaplasmosis;
• candidíase;
• clamídia;
• micoplasmose;
• A vaginose bacteriana;
• mononucleose infecciosa;
• tricomoníase;
• infección polo HPV;
• tuberculose;
• infección por herpes do 1º e do 2º tipo;
• Helicobacter pylori;
• citomegalovírus;
• difteria;
• salmonelose;
• a infección polo VIH.

Ademais, os métodos de PCR son utilizados no diagnóstico do cancro.

vantaxes do método

Diagnóstico de PCR ten varias vantaxes:

1. Alta sensibilidade. Mesmo con só algunhas moléculas de ADN microorganismo análise por PCR determina a presenza de infección. Axudará método para enfermidades crónicas e latentes que ocorre. Moitas veces, en tales casos, o microorganismo é inculta doutras formas.
2. Co fin de investigar calquera material axeitado, como a saliva, o sangue, a selección sexual, cabelo, células epiteliais. O máis común é unha proba de sangue e cotonete urogenital PCR.

3. Non require un culturas en crecemento estendidos. O proceso automatizado de diagnóstico permite a obtención de resultados dun estudo tras 4-5 horas.
4. O método é case completamente auténtica. Gravado só casos illados de resultado falso-negativo.
5. Capacidade para identificar distintos tipos de axentes patóxenos nun material de mostra. Isto non só acelera o proceso de diagnóstico da enfermidade, pero tamén reduce significativamente os custos materiais. Moitas veces, o médico prescribe unha análise ampla da PCR. investigación de prezos, que consiste en determinar os seis axentes patóxenos, é de preto de 1.500 rublos.

Recomendacións sobre preparación para a análise

Os resultados sexan válidos os estudos de PCR precisan ser probado, seguindo as recomendacións dos preparados preliminares para o diagnóstico:

1. Antes da entrega da saliva debe deixar de comer e de drogas, durante 4 horas antes da mostraxe do material. Inmediatamente antes do procedemento, lave a boca con auga fervida.
2. As regras anteriores debe ser guiada e cando se toma a mostra desde o interior da meixela. Tras o lavado recoméndase a realización dunha leve masaxe na pel para liberar secrecións prostáticas.
3. A urina é normalmente recadado na casa. Para iso, ten que realizar unha WC completa dos órganos xenitais. Nun recipiente de plástico estéril é necesario recoller 50-60 ml de urina. É recomendable a mulleres para introducir o tapón na vaxina, e homes, na medida do posible para tirar a pel dobra para garantir a pureza do material. Non pode levar o material durante a menstruación.
4. Para a entrega de esperma de absterse de relacións sexuais durante os 3 días anteriores á recollida de material. Ademais, os médicos son aconsellamos a abandonar o uso da sauna e baño quente, alcohol e alimentos picantes. Durante 3 horas antes da análise é necesario para absterse de urinar.
5. Para pasar o esfregaço urogenital, por exemplo, a análise sobre a clamídia PCR, homes e mulleres se recomenda que o descanso sexual por 3 días. 2 semanas antes da análise non pode tomar antibióticos. Durante unha semana, ten que deixar de usar o xel íntimo, pomadas, supositórios vaxinais, duchas hixiénicas. 3 horas antes do estudo debe absterse de urinar. Durante a menstruación material de selado non se realiza, só 3 días despois do remate de manchas pode tomar esfregaço urogenital.

PCR no embarazo

O período de espera para un bebé, moitas enfermidades infecciosas, enfermidades de transmisión sexual, son moi perigosos para o desenvolvemento fetal normal. Enfermidades de transmisión sexual poden desencadear o desenvolvemento intra-uterino, nacemento embarazo ou prematuro, malformacións conxénitas do neno. Polo tanto, é importante para obter o inicio do embarazo selección PCR. Pase análise é necesaria ao rexistrar - ata 12 semanas.

material de selado vén da canle cervical con cepillos especiais. O procedemento é indolor e non representa ningún perigo para o bebé. Normalmente durante o embarazo analizados por método de Chlamydia por PCR, así como ureaplasmosis, micoplasmose, citomegalovírus, herpes, virus do papiloma. Tal complexo exame chamado PCR 6.

PCR para o diagnóstico de VIH

Debido ao feito de que o método de reacción en cadea da polimerase é moi sensible a variacións no corpo e as condicións de diagnóstico, diversos factores poden afectar o resultado. Polo tanto, a análise de PCR para a infección por VIH non é un método fiable, a súa eficiencia - 96-98%. Os restantes 2-4% da proba dá resultados falsos positivos.

Pero en ocasións, sen diagnóstico PCR de VIH non pode facer. Normalmente, el é levado para persoas con ELISA falso-negativo. Estas cifras indican que a persoa aínda non desenvolveron anticorpos para o virus e non pode ser detectado sen aumentar o número de múltiple. Que isto pode ser conseguido a través da realización dun método de PCR exame de sangue.

Tamén é necesario un diagnóstico dos nenos primeiro ano de vida, nacidos de nais VIH-positivas. O método é o único xeito de determinar con fiabilidade o estado do neno.

PCR no diagnóstico de hepatite

Polimerase método de reacción en cadea de ADN permite a detección do virus da hepatite A, B, C, así antes de que a formación de anticorpos contra a infección ou o inicio dos síntomas. Particularmente eficaz é a análise por PCR en hepatite C, xa que o 85% de tales enfermidades son asintomáticos e sen tratamento oportuno se fai crónica.

detección atempada do patóxeno axudará a evitar complicacións e tratamento a longo prazo.

seguimento integrado PCR

Comprehensive Análise de PCR: o que é? Esta reacción seguimento método polimezarnoy cadea que inclúe determinar simultaneamente varias especies de infección: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovírus, urealitikum urealyticum, 1 e 2 do herpes tipo, gonorrea papilomavirus. O prezo deste diagnóstico varía de 2.000 a 3.500 rublos. dependendo da clínica, materiais e equipos, así como o tipo de análise: cualitativa ou cuantitativa. O que fai falta é o caso - o médico decide. Nalgúns casos, simplemente detectar a presenza do patóxeno en outros, como o VIH, o importante papel desempeñado polo título cuantitativa. referida como "análise de PCR de 12" para o diagnóstico de todo o exame patógenos anterior.

Descifrando os resultados da análise

análise de PCR de transcrición é simple. Hai só 2 escala de índice - "negativa" "positivo" e Tras a detección do axente patóxeno pode médicos con 99% de confianza -TH confirmar a presenza da enfermidade e para comezar o tratamento do paciente. No método cuantitativo de determinación da infección nun número de índice correspondente columna de bacterias detectadas será indicado. Só un médico pode determinar a extensión da enfermidade e prescribir o tratamento necesario.

Nalgúns casos, por exemplo na determinación de infección por VIH a través de PCR, cun resultado negativo, hai unha necesidade de estudos adicionais para confirmar estas figuras.

Onde facer a proba?

Onde pasar-PCR análise na clínica pública ou por un laboratorio privado? Desafortunadamente, o municipal equipos e métodos institucións médica son moitas veces superada. Por iso, é mellor dar preferencia a laboratorios privados con equipos modernos e persoal altamente cualificado. Ademais, nunha clínica privada de obter os resultados máis rápidos.

En Moscova, moitos laboratorios privados ofrecen análise de PCR para varias infeccións. Por exemplo, en tales clínicas como "Vita", "Clínica Integrada", "Familia Feliz", "uro-Pro", realizada análise de PCR. prezo investigación é de 200 rublos. para a determinación dun axente patóxeno.

Pode concluírse que o diagnóstico de enfermidades infecciosas por PCR na maioría dos casos é unha forma rápida e de confianza da detección do patóxeno no corpo nas fases iniciais da infección. Con todo, en certos casos, a elixir métodos de diagnóstico. Determinar a necesidade dun estudo tal, só pode ser un experto. PCR análise descifrado tamén require un enfoque profesional. Siga os consellos do seu médico e non dan a seus propios probas, que non son necesarios.